表观组研究 分子互作研究

CUT&Tag 分子互作研究服务
低起始量 · 高信噪比

基于pA-Tn5转座酶融合技术,在抗体引导下靶向切割目的蛋白附近的DNA序列。无需甲醛交联与超声打断,最低仅需60个细胞即可完成实验,适用于组蛋白修饰、转录因子及RNA聚合酶II等蛋白质-DNA互作研究。

60细胞
最低起始量
高信噪比
无需交联与超声
多靶标
组蛋白/转录因子/Pol II
操作简便
无需免疫共沉淀
CUT&Tag Assay JZ040201
H3K4 H3K27 pA-Tn5 Ad1 Ad2 Antibody-guided pA-Tn5 Tagmentation
靶位点精准切割
JZ040201
低起始量
产品概述

CUT&Tag · 蛋白质-DNA互作研究新方法

CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)是一种研究蛋白质与DNA互作的高效方法。该方法通过将高活性的Tn5转座酶与Protein A融合形成pA-Tn5转座复合物,在抗体的引导下靶向切割目的蛋白附近的DNA序列,并同时在序列两端加上测序接头,经PCR扩增后形成可直接用于高通量测序的文库。

应用范围

组蛋白修饰
转录因子结合
RNA聚合酶II
临床表观遗传
基因调控机制

结合生物信息学分析,找到转录因子下游调控的靶基因,为进一步阐明生物学机制提供依据。

技术原理与实验流程

抗体引导的精准切割与接头添加

与传统ChIP-Seq相比,CUT&Tag无需甲醛交联与免疫共沉淀,通过抗体和Protein G/A介导使融合的Tn5酶在靶位点直接切割并加接头,实验流程更短、信噪比更高。

ChIP-Seq 传统方法

  • 需要甲醛交联,可能引起抗原决定簇遮盖
  • 需要超声打断,样本损失大
  • 需要免疫共沉淀,操作复杂
  • 需要大量细胞(通常10⁶以上)

CUT&Tag 新方法

  • 无需交联,避免抗原决定簇遮盖问题
  • 无需超声,减少样本损失和背景噪音
  • 无需免疫共沉淀,操作简便流程短
  • 低起始量,最低仅需60个细胞

实验流程

1

细胞收集

细胞沉淀制备

2

一抗孵育

靶蛋白结合

3

二抗结合

信号放大

4

pA-Tn5结合

转座复合物招募

5

靶位点切割

加接头同步完成

6

DNA提取

片段化DNA纯化

7

PCR扩增

文库扩增富集

8

文库质检

浓度与片段分布

9

上机测序

高通量测序

技术优势

五大核心优势 · 高效可靠

相比传统ChIP-Seq技术,CUT&Tag在起始量、信噪比、操作便捷性等方面表现突出

低起始量

最低仅需60个细胞即可完成实验,特别适合稀有样本和微量细胞的研究需求。

高信噪比

无需交联与超声打断操作,规避了其所引起的抗原决定簇遮盖和样本损失问题,提高了信噪比。

操作简便

无需免疫共沉淀,切割与加接头一步完成,实验流程更短,操作更便捷。

重复性好

酶切反应更均匀稳定,实验结果重复性好,数据质量更可靠。

适用范围广

适用于组蛋白修饰、转录因子、RNA聚合酶II等多种靶标的蛋白质-DNA互作研究。

服务目录号

JZ040201

CUT&Tag 分子互作研究服务,可根据研究需求定制实验方案。

生信分析内容

全面的生物信息学分析流程

从原始数据质控到功能富集分析,提供完整的CUT&Tag数据分析解决方案

基础分析内容

1

原始测序数据质量评估

FastQC质量统计、碱基分布分析

2

比对参考基因组

Bowtie2/BWA比对、比对率统计

3

gene body富集热图

基因区域富集分析、信号分布可视化

4

ChIP质量评估

FRiP值计算、文库复杂度分析

5

累计分布曲线

信号强度分布、基因组元件占比

高级分析内容

1

Peak calling(MACS2叫峰)

MACS2峰检测、峰统计与注释

2

Peak注释

基因组元件分布、邻近基因注释

3

Motif分析

结合序列特征分析、转录因子富集

4

差异peak鉴定与注释

组间差异峰检测、火山图/MA图展示

5

差异peak功能富集分析

GO/KEGG富集分析、通路可视化

样本要求

多种样本类型 · 送样须知

支持细胞样本和动物组织样本,不同样本类型有不同的送样要求和运输条件

样本类型与送样要求

样本类型 起始量要求 样本质量要求 运输条件
细胞样本 细胞数 > 60个 上海周边地区可以送贴壁或悬浮细胞,细胞活率需达90%以上 常温运输
动物组织(小量) 质量 > 10mg 组织需要新鲜,无血管无结缔组织等杂质 -80℃冻存,干冰运输
动物组织(大量) 质量 > 500mg 锡纸包裹,组织完整,液氮速冻 液氮冻存,干冰运输
交付流程

规范的项目交付流程

从项目启动到报告交付,全流程透明可控,周期视项目而定

方案设计

定制实验方案

样本接收

样本质检入库

实验执行

CUT&Tag建库测序

生信分析

数据分析交付

报告交付

项目结题与售后

服务方案

三档方案 · 按需选择

基础/高级/定制三档方案,满足不同研究深度需求

基础方案

基础分析

适合初次开展CUT&Tag研究,获取基础数据质量与整体分布

  • 原始数据质量评估
  • 参考基因组比对
  • ChIP质量评估
  • gene body富集热图
咨询详情
推荐
高级方案

高级分析

包含基础分析全部内容,提供Peak calling、差异分析及功能富集等深度分析

  • 基础分析全部内容
  • Peak calling 与注释
  • Motif 分析
  • 差异peak鉴定与功能富集
获取方案
定制方案

定制分析

根据研究目标定制专属分析内容,包含个性化可视化和深度挖掘

  • 高级分析全部内容
  • 多组学联合分析
  • 个性化图形绘制
  • 一对一技术支持
定制方案
常见问题

CUT&Tag 常见问题解答

Q1

CUT&Tag 与 ChIP-Seq 相比有哪些主要区别?

CUT&Tag 与传统 ChIP-Seq 的主要区别在于:(1)无需甲醛交联,避免了交联引起的抗原决定簇遮盖问题;(2)无需超声打断,减少了样本损失和背景噪音;(3)无需免疫共沉淀,操作更简便,实验流程更短;(4)起始量更低,最低仅需60个细胞即可完成实验;(5)Tn5酶在靶位点直接切割并加接头,一步完成建库,信噪比更高。

Q2

CUT&Tag 可以检测哪些类型的靶标?

CUT&Tag 技术可从基因组范围内检测多种蛋白质结合的DNA区域,包括:组蛋白修饰(如H3K4me3、H3K27ac、H3K27me3等)、RNA聚合酶II、以及各种转录因子。适用于临床和科研的表观遗传学研究,结合生物信息学分析可找到转录因子下游调控的靶基因,为阐明生物学机制提供依据。

Q3

CUT&Tag 实验对样本有什么要求?

CUT&Tag 支持多种样本类型:细胞样本需大于60个,上海周边地区可送贴壁或悬浮细胞,常温运输;动物组织小量样本需大于10mg,组织需要新鲜且无杂质,-80℃冻存,干冰运输;动物组织大量样本需大于500mg,锡纸包裹后液氮冻存,干冰运输。具体送样细节请联系我们的技术支持。

Q5

CUT&Tag 的生信分析包含哪些内容?

CUT&Tag 的生信分析内容包括:原始测序数据质量评估、比对参考基因组、gene body富集热图、ChIP质量评估、累计分布曲线、Peak calling(MACS2叫峰)、Peak注释、Motif分析、差异peak鉴定与注释、差异peak功能富集分析等。我们提供基础分析方案和高级分析方案,也可以根据您的研究需求定制个性化分析内容。

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